液相色譜儀(HPLC)作為現代分析化學中的重要設備,廣泛應用于藥物分析、食品安全、環境監測、生物化學等多個領域。為了確保儀器運行穩定、數據準確可靠,在每次使用前做好充分的準備工作至關重要。那么,
液相色譜儀在使用前需要做哪些準備呢?
首先,操作人員應熟悉儀器的操作規程和相關實驗方法,了解所用色譜柱的類型、流動相的配比以及檢測器的參數設置。同時,檢查實驗所需的試劑、溶劑是否齊全,并確保其純度符合要求,避免雜質干擾分析結果。
其次,應對液相色譜系統進行基本檢查。包括:確認泵的壓力傳感器、流路連接無泄漏;檢查脫氣機是否正常工作,以防止氣泡進入系統影響泵的穩定性;查看色譜柱是否安裝正確,是否有堵塞或漏液現象;確認檢測器燈源是否點亮,基線是否穩定等。
接下來是流動相的準備。流動相應使用HPLC級溶劑,并經過0.45μm或更細孔徑的濾膜過濾,去除微粒雜質。同時,流動相應進行超聲脫氣或在線脫氣處理,以減少氣泡對流速和檢測信號的影響。不同實驗所需的流動相比例應提前配置好,并根據需要調節pH值或添加緩沖鹽。
樣品的預處理同樣不可忽視。樣品溶液應經過適當的過濾(如使用一次性濾頭)和稀釋,避免顆粒物進入色譜柱造成堵塞或損傷固定相。對于復雜基質樣品,還應考慮采用固相萃取(SPE)等凈化手段,以減少對色譜系統的污染。
此外,開機前應開啟排液閥進行“purge”操作,排出泵內可能存在的氣泡,確保系統壓力穩定。然后關閉排液閥,設定合適的流速和檢測波長,待基線穩定后再開始進樣分析。
而且,實驗室環境也需符合要求,保持恒定的溫度和濕度,避免震動和灰塵影響儀器性能。同時,應建立完整的使用記錄和維護計劃,定期清洗流路、更換密封圈等易損件,確保儀器長期處于良好狀態。

總之,液相色譜儀在使用前的準備工作雖然繁瑣,但每一步都直接影響到分析結果的準確性與重復性。只有認真細致地完成各項準備,才能充分發揮儀器的性能,為科研和生產提供可靠的數據支持。